第110回理論① 薬剤師 問118
マクロファージをリポ多糖で刺激して得た培養液を採取し、この培養液中のサ イトカインＸの濃度をサンドイッチELISA（Enzyme︲linked immunosorbent assay） 法で定量することにした。各試料をマイクロプレートに採取し反応を行った後、 450 nm の吸光度を測定した。サイトカインＸの標準物質を用いて標準曲線（検量 線）を作成したところ、下図のようになった。この測定に関する記述として適切な のはどれか。2つ選べ。 標準曲線（検量線） ）mn054：長波定測（度光吸 0.8 0.6 0.4 0.2 0 200 400 600 800 1000 1200 サイトカインＸ（pg/mL）
1
この培養液の測定値が吸光度 1.5 であった場合、培養液を希釈して再測定する ことが必要である。
✓ 正解
2
10 倍希釈した培養液の測定値が吸光度 0.6 である場合、もとの培養液中のサイ トカインＸ濃度は約 600 pg/mL である。
3
培養液に含まれる別のサイトカインＹを測定するためには、サイトカインＸの 測定とすべて同じ抗体を利用できる。
4
サンドイッチ ELISA 法では抗原に対する 2 種類の抗体が使われるが、それぞ れの抗体が認識するエピトープは異なる。
✓ 正解
5
この培養液の測定で発色が検出限界以下だった場合、標準曲線（検量線）の測 定の場合よりも反応時間を長めにしてもよい。
選択肢をクリックして選んでください。
解説
- 2.✕「10倍希釈した培養液の吸光度が0.6なら、もとの濃度は約600 pg/mLである」検量線から読み取った希釈後の濃度に希釈倍率を掛けて算出する必要があり、計算が誤り。
- 3.✕「サイトカインYの測定にXの測定とすべて同じ抗体を利用できる」抗体は抗原特異的で、別のサイトカインには同じ抗体を使えない。
- 5.✕「発色が検出限界以下なら反応時間を長めにしてもよい」標準曲線と同じ条件で測定する必要があり、反応時間を変えてはならない。
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