第107回理論① 薬剤師 問114
職種:
薬剤師
問題文
薬物Aに感受性のある培養細胞を用いて、その細胞内の代謝調節タンパク質B について調べることにした。 図 ₁ 薬物A ₁ 時間培養 培地を除去 細胞を回収し破砕する 低速遠心 上清 沈殿(核画分) 高速遠心 上清を除去 沈殿(膜画分) 操作の流れを図 ₁ に示す。培地に薬物Aを添加して細胞を ₁ 時間培養した後、培 地を除去してから細胞を回収した。細胞を破砕し、低速度の遠心操作で核画分を分 離回収した。さらに高速度の遠心操作で、核を除いた細胞の膜画分を分離回収し た。また、対照として、培地に薬物Aを添加しなかった細胞についても同様の操作 を行った。 ドデシル硫酸ナトリウムを用いたポリアクリルアミド電気泳動(SDS︲PAGE) にて、核画分及び膜画分中のタンパク質を分離し、タンパク質Bに対するポリク ローナル抗体を用いてウエスタンブロットを行った。SDS︲PAGE は、還元剤(₂︲ メルカプトエタノール)を添加した条件と添加しない条件の ₂ 通りの方法で行った ところ、図 ₂ に示す結果を得た。 図 2 還元剤非添加 還元剤添加 分子量 分子量 (kDa) (kDa) 100 100 70 70 50 50 30 30 20 20 レーン 1 2 3 ₄ レーン 1 2 3 ₄ レーン 1 薬物A非添加 核画分
選択肢
- 1. タンパク質Bは、核膜に局在するタンパク質である。
- 2. タンパク質Bは、分子間ジスルフィド結合を持つ。 ✓ 正解
- 3. タンパク質Bから生じた約 30 kDa のタンパク質は、核内に移行する。 ✓ 正解
- 4. タンパク質Bは、薬物Aで刺激された細胞内で 3 つに切断される。
- 5. タンパク質Bの分子量は、約 50 kDa である。
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解説
解説は準備中です。随時加筆予定です。
出典
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