第106回理論① 薬剤師 問113
検体中における、ある微生物の存在を調べるために、リアルタイム PCR 法を 実施した。以下に示す測定手順で行い、測定した結果を図に示す。この実験に関す る記述のうち、正しいのはどれか。2つ選べ。 測定手順 3 つの検体(試料 1 ~ 3 )をサンプルチューブに別々に採取し、それぞれに DNA 抽出用の試薬を加える。 ↓ 抽出した DNA を定量する。 ↓ 各検体から一定量の DNA を別々のチューブに取り、それぞれのチューブに二本 鎖 DNA を検出する蛍光色素、デオキシヌクレオチド混合物、プライマー 1 組、 酵素を含む反応液を加えて、PCR を開始する。 ↓ 蛍光強度を測定することで、反応産物が増幅されていく経過を追いながら、PCR を約 40 サイクルまで繰り返す。 試料 1 試料 2 試料 3 10 20 23 度強光蛍 閾値* 26 30 サイクル数 *閾値:設定したある蛍光強度の値
1
目的とする微生物の存在量が最も多かったのは、試料 3 である。
2
この測定手順で、細菌、DNAウイルス及びRNAウイルスの検出が可能である。
3
試料 1 と試料 3 に含まれる微生物の存在量は、約 106 倍異なると推定される。
4
各試料とも 25 サイクルを超えるあたりから曲線が頭打ちになる主な原因は、 デオキシヌクレオチドが枯渇するためである。
✓ 正解
5
PCR 開始時に反応液に加える酵素には耐熱性のものを用いる。
✓ 正解
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